تشخيص أمراض نقص المناعة

تشخيص أمراض نقص المناعة

نقص المناعة

تشخيص أمراض نقص المناعة

يتكون الجهاز المناعي من جزأين يسمى السلامة الجوهرية والسلامة المكتسبة. وتشمل السلامة الجوهرية السدود الفيزيائية والكيميائية مثل الجلد والمخاط والبروتينات العائمة في البلازما، مثل البروتينات المكملة والخلايا المنتبذة الغريبة مثل العدلات والبلاعم والخلايا الطبيعية الفتاكة.

تشخيص أمراض نقص المناعة

 تمتلك المناعة المكتسبة ذراعين مهمين يدعى المناعة الخلوية. أهم الخلايا في اللمفاوية مناعة T ومناعة من الخلايا اللمفية هي الخلايا اللمفية B. يتم تنفيذ آليات اللمفاويات التائية بواسطة الخلايا الليمفاوية T نفسها ، وجزئيا من خلال البلاعم النشطة. تلعب الخلايا الليمفاوية B دورًا في إنتاج وإفراز الجلوبيولينات المناعية.

كل من هذه الخلايا نشطة ضد مستضد وتؤدي إلى ردود محددة. ومع ذلك، فإن السلامة الجوهرية للاستجابة المناعية الخاصة أقل أهمية.

نقص المناعة (Immunodeficiency) يعني الأداء غير السليم لجهاز المناعة، حيث يكون الأفراد عرضة لمجموعة متنوعة من العدوى. يمكن أن يكون نقص المناعة الابتدائي والثانوي أو المكتسب. معظم أمراض المناعة الأولية هي عيوب وراثية أو وظيفة جهاز المناعة ولها أساس جيني. في حالات العوز المناعي الثانوي، تسببت الأمراض غير المناعية مثل العدوى البكتيرية أو الفيروسية أو سوء التغذية أو العلاج بالأدوية المثبطة للمناعة في نقص المناعة. أشهر فيروس نقص المناعة الثانوي هو الإيدز.

تقييم جهاز المناعة

غالبًا ما يبدأ تقييم الجهاز المناعي بصيغة العد (CBC) وصفيحة الدم المحيطية ومعدل الترسيب ESR. الغرض من هذه الدراسة هو تحديد الكريات البيض، نقص اللمفاوية، العدلات، وأشكال غير طبيعية من خلايا الدم المحيطية واحتمال العدوى البكتيرية.

تقييم وظيفة الخلايا الليمفاوية B

يعتبر نقص الأجسام المضادة هو النوع الأكثر شيوعًا من العيوب المناعية، وذلك بسبب عدم وجود تمايز بين الخلايا الليمفاوية B في نخاع العظم أو الأنسجة اللمفاوية المحيطية، وبالتالي عدم قدرة الخلايا اللمفاوية البائية على إفراز الأجسام المضادة بشكل كافٍ أو بجودة مثالية. المرضى الذين يعانون من نقص أولي من الأجسام المضادة هم عرضة لمجموعة متنوعة من الالتهابات البكتيرية.

الاختبار الأول لتقييم وظيفة الخلايا اللمفاوية B هو قياس الغلوبولين المناعي في الدم. يساعد القياس الكمي IgA ، IgG و IgM بواسطة ELISA أو SRID في اكتشاف العوز الكلي للغلوبولين المناعي. ومن المفيد أيضا في تحديد نقص واحد أو أكثر من فصول الجلوبيولين المناعي. في دراسة الخلايا اللمفاوية البائية، يكون الرحلان الكهربي لبروتينات المصل والايبريو الكهربي والفرز الكهربي المناعي له حساسية قليلة وقدرة على القياس الكمي.

غالبًا ما يكون لدى المرضى الذين يعانون من قصور في الأضداد أجسام مضادة منخفضة في المصل، ولكن في بعض الأحيان تكون الأجسام المضادة طبيعية، ولكن وظيفتها ليست طبيعية. اكثر عوز 88 ٪ هو نقص الأجسام المضادة IgA.

الأمراض القلبية الوعائية (CVD) الشائعة هي متلازمة تتميز بتناقص الأجسام المضادة للدورة الدموية وعدم القدرة على إنتاج الأجسام المضادة مع العدد الطبيعي للخلايا البائية الطرفية. التوزيع الجنسي في CVID متساو تقريبا ويؤثر على الرجال والنساء على حد سواء. يمكن أن تبدأ بداية العدوى المتكررة في المرضى في أي عم، ولكن الأعراض الأولى تكون أكثر شيوعًا في الفئة العمرية من 1-5 و 16-20 سنة من العمر.

هذا المرض یعنی فقد غاماغلوبولين الدم هو نوع من أنواع نقص المناعة الأولية يتصف بالعدوى البكتيرية المتكررة ونقص الجسم المضاد في المصل وانخفاض في الخلايا الليمفاوية للدم. يؤدي التحور في جين BTK (تشفير الجين التيروزين كيناز bruton) إلى حدوث المرض. ولا يُشاهد المرض، الذي يطلق عليه التراص النشط جنسياً فقد غاماغلوبولين الدم، أو يُعرف بـ XLA، إلا لدى الرجال فقط.

تقييم وظيفة الخلايا الليمفاوية T

الخلايا اللمفاوية T لها وظيفة أكثر تعقيدًا من الخلايا الليمفاوية B. لذلك فإن تقييم أدائها يكون أكثر صعوبة. هناك أيضا اختبارات بسيطة وغير مكلفة وموثوق بها للتحقق من وظيفة الخلايا T.

تأخر رد فعل حساسية الجلد

يستخدم هذا الاختبار مع مجموعة من المستضدات لفحص البالغين والأطفال (باستثناء الرضع والأطفال الرضع). النتيجة الإيجابية في تأخير اختبار حساسية الجلد غالبا ما تكون علامة على الأداء الطبيعي للخلايا التائية والحصانة الخلوية. بالطبع، يجب أن نلاحظ أن النتيجة الإيجابية في اختبار تأخر الجلد المتأخرة التي أجريت مع مجموعة من المستضدات لا يمكن أن تكون علامة على الأداء الطبيعي للجهاز المناعي ضد المستضدات الأخرى. على سبيل المثال، في حالة أمراض القلب والأوعية الدموية المخاطية المزمنة، قد تكون وظيفة المناعة طبيعية لجميع المستضدات غير المبيضات. بالإضافة إلى ذلك، تعتمد النتيجة الإيجابية لهذا الاختبار على التعرض السابق للبشر. على سبيل المثال، تلقى الاشخاص مولدات المضادات من خلال اللقاح أو العدوى، ولكن في الأطفال حديثي الولادة ربما لا يزالون لم يتعرضوا لبعض المستضدات. وبالتالي، فإن اختبار الحساسية الجلدية سلبي، وهذه هي نتيجة سلبية من اضطراب النظام المناعي الخلوي ليس كذلك.

فحص السيتوكينات

السيتوكينات هي عبارة عن بروتينات تفرز من الخلايا المناعية الذاتية والمكتسبة وتحفز وتنظم الاستجابات الالتهابية المناعية. بسبب التأثيرات البيولوجية المحددة لأي سيتوكين، فإن نقص أو زيادة كل منهما يؤدي إلى مرض واختلال الجهاز المناعي للفرد. من الممكن الآن تقييم إفراز السيتوكينات من الخلايا الليمفاوية B و T ، مثل الانترفيرون جاما، TNF-α و انترلوكينهناك طريقتان لإليسا، مقايسة مناعية مسامية، تألق صغير، وهكذا.

زراعة الكريات البيض المختلطة (ثقافة ليمفاوية مختلطة)

في هذه الدراسة، إذا كانت الخلايا اللمفاوية من شخصين متجاورتين لمضادات الدرجة الثانية مختلفة، فإن كل خلية ليمفاوية يتم تحفيزها وتحسينها بواسطة الخلايا الليمفاوية الأخرى. لتسهيل الإدراك، فإن التفاعل عادة يعطل عينة تحت تأثير الإشعاع أو بعض المواد (كمنبهات)، ويستخدم الآخر كرد فعل؛

يسمى هذا MLR اختبار اتجاه واحد. في كثير من الأحيان، يتم تحديد نوع المستضد للخلية المنشطة ويحدد الفرق أو تشابه الخلايا الليمفاوية المستجيب. وهكذا، إذا كان المستضد من كلا النوعين متطابقين، فلن يتم تحفيز الخلايا المستجيبة ، ولكن إذا كانت هناك اختلافات ، يحدث التكرار اللاحق للخلايا الليمفاوية للمستجيب. يمكن قياس درجة انتشار الخلايا الليمفاوية من خلال قدرة هذه الخلايا على امتلاء تيميدين المشعة في الحمض النووي.

تشخيص أمراض نقص المناعة

التدفق الخلوي

يمكن استخدام هذا الاختبار بشكل غير مباشر لتقييم وظيفة الخلايا T. قياس الانسياب هو طريقة دقيقة وعالية الأداء تستخدم لتحديد الخلايا وتقييم خصائصها. تعتمد هذه التقنية على انتشار الضوء بواسطة الخلايا المختبرة وانبعاثها الفلوري. يتم الحصول على انبعاثات الإسفار مباشرة عن طريق الفلوری تعلق على المكونات الخلوية أو خليط من صبغة الفلورسنت مع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة. هذه الأجسام المضادة المتقاربة الفلورة يمكن أن تكتشف وتعلق جزيئات سطحية أو توليفات داخلية للخلايا وتسمح بالكشف عن أنواع الخلايا في مجموعة متنوعة من الخلايا عن طريق التدفق الخلوي. في هذه الطريقة، يتم استخدام الأجسام المضادة أحادية النسيلة لجزيئات سطح معينة من الخلايا اللمفاوية التائية مثل CD2 و CD3 المترافقة مع المواد الفلورية (لفحص الخلايا T الكلية) ، CD4 (اختبار الخلايا T) و CD8 (مراقبة الخلايا السامة T) خلل التنسج الخلقي من الغدة الصعترية (متلازمة دي جورج) هو شذوذ كروموسومي يحدث بسبب حذف صغير في الكروموسوم 22. يحدث هذا الحذف في الجزء الأوسط من الكروموسوم على الذراع الطويلة في منطقة 11.2 جم. هذا المرض هو واحد من أهم اضطرابات اللمفاويات T. في هذا المرض، تكون الغدة الصعترية والغدة الدرقية أصغر من الطبيعي ولا تتطور. يؤدي الافتقار إلى نمو الغدة الصعترية، والذي خلال الطفولة إلى مسؤولية إنتاج وتطور الخلايا اللمفاوية T، إلى حدوث عدوى متكررة لدى هؤلاء الأفراد. أيضا، قد يؤدي ضعف وظيفة الغدة الدرقية إلى إفراز PTH أقل من هذه الغدة، مما يؤدي إلى نقص كلس الدم وما يترتب على فرط فوسفات الدم في الطفل. تشوهات القلب، مشاكل في الجهاز التنفسي، الفشل الكلوي، انخفاض مستويات الكالسيوم في الدم، انخفاض عدد الصفائح الدموية، الحنك المشقوق، والالتهابات المتكررة، وبعض اضطرابات المناعة الذاتية المتقدمة ، مثل التهاب المفاصل الروماتويدي، مرض الجاذبية، وتأخر النمو. من أعراض المرض. داء المبيضات الجلدي هو التهاب الغشاء المخاطي المزمن في الأغشية المخاطية والجلد والأظافر، التي تسببها المبيضات البيض. وترتبط هذه الحالة مع اختلال وظيفة الخلايا الليمفاوية T. وينظر المرض في الرجال والنساء. قد يكون هذا الاضطراب مصحوبًا باضطرابات الغدد الصماء المتعددة ، مثل الغدد الكظرية المعيبة أو الغدد جارات الدرق، وخاصة مرض أديسون، والذي هو السبب الرئيسي للوفاة في هؤلاء المرضى. نقص المناعة الشديد (SCID) هو فئة من اضطرابات الجهاز المناعي ترجع إلى عدم قدرة الأم وخلايا الدم على التطور إلى الخلايا الليمفاوية للخلايا T أو الخلايا الليمفاوية B وتعوق وظيفة هذه الخلايا. في هذه الأمراض ، هناك انخفاض كبير في عدد الخلايا الليمفاوية في الدم. يتعرض هؤلاء الاشخاص لكثير من العدوى. يمكن أن تعزى هذه الأمراض إلى نقص الأدينوزين ديمايناز، ترنجييكتاس ترنح، ومتلازمة فيسكوت-الدريش. قد يكون سبب العيوب الثانوية في الجهاز المناعي هو فقدان الخلايا الليمفاوية B أو T أو ضعفها في أمراض مثل سرطان الرئة، حيث يتم استبدال الخلايا السرطانية بالخلايا الطبيعية. حتى الآن، كان السبب الأكثر شيوعًا لمرض نقص المناعة الثانوي في البلدان المتقدمة هو استخدام الأدوية الكيميائية لعلاج السرطان. العديد من الأدوية سامة لخلايا نخاع العظام والخلايا الليمفاوية B و T. متلازمة نقص المناعة المكتسبة هي نوع من نظام المناعة الذي طوره فيروس نقص المناعة (HIV). المرض الذي يسببه فيروس نقص المناعة البشرية لديه ثلاث مراحل رئيسية. في المرحلة الأولى (العدوى الحادة)، بعد أسبوعين إلى أربعة أسابيع من الإصابة، يظهر ضعف عام وأعراض أخرى، وكلها تتعافى بعد أسبوعين إلى 11 أسبوعًا. تتم متابعة المرحلة الثانية من المرض لفترة طويلة دون أي أعراض (فترة كامنة). ومع تقدم المرض، فإنه يتدخل أكثر في الجهاز المناعي، مما يؤدي إلى إصابة الاشخاص بالعدوى مثل الالتهابات الانتهازية والأورام، التي عادة ما تكون غير فعالة في الأشخاص الذين يعمل نظامهم المناعي بشكل جيد. في نهاية المطاف، يدخل المرض إلى المرحلة الثالثة أو الإيد، حيث يصل عدد خلايا CD4 + T إلى أقل من 200 خلية لكل ميكروليتر.

فحص دراسة وظيفة الاغتراب

البلعمة هي عملية تُحاط فيها الجسيمات والجراثيم الخارجية بأغشية الخلايا وتدخل الخلية في حويصلات ، حيث يتم هضمها بواسطة آليات إنزيمية ، إلخ. يتم تنفيذ هذا الإجراء على الجسم بواسطة الخلايا البالعة أحادية النواة (أحادية الخلايا والبلاعم). الناميات المتعددة النوكليوتيدات (العدلات). لتقييم البالعات ، يجب اعتبارها من حيث العدد والأداء. في بعض الأمراض ، مثل ندرة المحببات الوراثية والعدلات ، يتناقص عدد الخلايا المغتربة وهذا يسبب المرض. في مثل هذه الحالات ، سيكون العد الكامل والتفاضلي لخلايا الدم مفيدًا في التشخيص. تقييم كل من السمية الكيماوي ، البلعمة والقتل البكتيري للخلايا داخل المختبر يمكن أن يكون مفيدا في تقييم وظيفة الخلايا المغتربة ، التي تتطلب مختبرات متخصصة. في الوقت الحاضر ، هناك اختبارات بسيطة أكثر تقييم عملية الأيض المرتبطة بالبلعمة لتقييم وظيفة الاغتراب.

يعد الورام حبيبي ويغنري (Chronic granulomatous disease, CGD) اضطرابًا رئيسيًا في الجهاز المناعي ، حيث تعاني البالعات المناعية الذاتية من عيوب. المرضى الذين يعانون من CGD لديهم حساسية عالية لالعدوى البكتيرية والفطرية. يتم توريث المرض إما في الكروموزوم الذي يعتمد على X أو غير الجنس (مقهورة). سبب المرض هو طفرة في أحد الجينات التي ترمز إلى مجمعات بروتينية تسمى معقد أوكسيداز (Phox) أو إنزيم NADPH ، وهو إنزيم ينتج جذور أكسدة مبيدة للجراثيم. أثناء دفاع الجسم ضد الميكروبات ، فإن تنشيط معقد الإنزيم من خلال تجديد الأكسجين الجزيئي ينتج مركبات ROS مثل بيروكسيد أو جزيئات المتطرفة. الجذور الحرة للأكسجين تنتج الجذور الحرة مثل الهيدروكسيل الراديكالي ، بيروكسيد والأحماض هالو لديهم نشاط مضاد للميكروبات، يدعى انفجر تنفسي( (Respiratory burst

في النوع المتغاير المتغير المتصل CGD ، يكون نشاط التأكسد أمرًا طبيعيًا ، والطريقة الوحيدة لتحديد هؤلاء الأفراد من خلال الاختبارات الجينية هو. في حالة نوع الزيجوت المتماثل المعتمد على x ، فإن نشاط العدلات المؤكسدة يضعف. الاختبارات الجينية متوفرة أيضا لتحديد المرضى المتنصرين جسديا بسبب نقص الأعراض السريرية.

غالبًا ما يرتبط CGD بالطفولة ويرتبط بالعدوى الفطرية المتكررة والتليف الكيسي الداخلي (الذي يدمر بيروكسيد الهيدروجين). بسبب خلل في قتل جراثيم بلعمية ، تقوم الخلايا اللمفاوية T بتنشيط البلاعم المزمنة وتسبب الورم الحبيبي.

اختبار NBT (Nitro Blue Tetrazolium Test)

يجمع اختبار NBT بين لون شفاف عديم اللون يبتلعه التعرض للعدلات. يتم استرداد هذه المادة في وجود وسيطة الأكسجين التفاعلية (ROS) داخل الخلية وتحويلها إلى مجمع يسمى فورمازون، وهو اللون الأزرق الأرجواني. في المرضى الذين يعانون من مرض حبيبي مزمن (CGD) ، العدلات ليس لديهم القدرة على إنتاج ROS ، مما أدى إلى مزيج من NBT غير مخفف (اختبار سلبي) وتغير اللون. من خلال الفحص المجهري للعدلات التي يتكون فيها السيتوبلازم من ترسيب فورمازان ، يتم الحصول على معدل استعادة NBT كنسبة مئوية. كمية NBT المستردة تتناسب مع كمية جذور الأكسجين التي تنتجها البالعات في الرشقة التنفسية. إذا لم تكن العدلات لدى المريض قادرة على إنتاج فائق الأكسيد ، فإن هذا الترسب لا يلاحظ.

تشخيص أمراض نقص المناعة

  • يستخدم اختبار NBT لتقييم الانفجارات التأكسدية في المرضى الذين يعانون من مرض حبيبي ویغنری (CGD).
  • ينطبق هذا الاختبار أيضًا على الأشخاص المصابين بالعدوى المتكررة في العظام والجلد والمفاصل والرئتين وأجزاء أخرى من الجسم.
  • اختبار NBT في المواد الطبيعية ، إذا كان أكثر من 80 ٪ من العدلات إيجابية ، عندما يقترن التحفيز متعدد النوكليوتيد في البلعمة NBT. هذه النسبة المئوية في المرضى الذين يعانون من الحبوب الحبيبية المزمنة تصل إلى أقل من 80 ٪. في غياب التحفيز ، أقل من 10 ٪ من الخلايا متعددة النواة إيجابية في الأفراد NBT الطبيعي. في هذا الاختبار ، يتم تنفيذ التحفيز بواسطة PMA (Phorbol myristate acetate)  في الدم NBT.
  • اختبار NBT غير موثوق للتمييز بين العدوى البكتيرية والفيروسية المعدية الأخرى بسبب الإيجابيات الكاذبة.

انتباه:

  • يتم استخدام الدم المحتوي على الهيبارين أو EDTA لاختبار
  • بعد أخذ العينات، يجب إرسال العينة على الفور إلى المختبر.
  • عينة مع تجلط الدم أو انحلال الدم هي شديدة في اختبار التداخل.

اختبار  DHR (Dihydrorhodamine) 123 assay   

يستخدم هذا الاختبار لتشخيص المرضى الذين يعانون من CGD ، لتحديد ناقلات X المرتبطة و CGDs جسمية مقهورة ، وتقييم نشاط NADPH اکسیداز. يعتمد التشخيص المختبري CGD على تقييم أداء NADPH اکسیداز في العدلات باستخدام اختبار NBT أو عن طريق اختبار مختبری DHR أكثر حساسية ودقة. وبعبارة أخرى ، يمكن تحقيق القياسات غير المباشرة لأنواع الأكسجين النشطة التي تنتجها NADPH oxidase من خلال قياسات DHR ، بحيث أن تنشيط العدلات مع PMA يؤدي إلى أكسدة DHR إلى تكوين مضان من رودامین  123، والتي يمكن الكشف عنها عن طريق التدفق الخلوي. قياس التدفق الخلوي قادر على اكتشاف أشكال مختلفة من CGD.

يعد اختبار DHR طريقة دقيقة وحساسة جدًا لطرق مثل NBT. في اختبار DHR ، يتم فحص معدل مضان في ما لا يقل عن عشر الفا خلية بواسطة جهاز قياس التدفق الخلوي ومقارنة بالخلايا غير المثبطة ، بينما في اختبار NBT ، توجد البلعمة عادة في النسبة المئوية للخلايا مع الفحص المجهري التقليدي.

تشخيص أمراض نقص المناعة

 

دراسة وظيفة المتمم
المتمم عبارة عن نظام منتظم يحتوي على أكثر من 20 بروتين مصلي يلعب دورا مهما جدا في حماية الجسم من العوامل الخارجية، مثل الكائنات الدقيقة التي تهاجم الجسم، بالإضافة إلى الافات الالتهابية. يعتمد النشاط المتمم على الانهيار التتابعي للمكونات المتممه، التي تعزز هذه الاستجابة النهائية وتنتج العديد من المنتجات الناتجة عن انهيارالمكمل، وبعضها يقوم بنشاطات حيوية مهمة.

تشخيص أمراض نقص المناعة

يتم التحكم في النظام المكمل بدقة عن طريق العوامل التنظيمية، مع بعضها البعض أو جزيئات النظام الأخرى بالترتيب القضاء على الجراثيم. يلعب نظام المتمم دوراً هاماً في السلامة المتأصلة والمقارنة. قد يتم تنشيط هذا النظام عبر المسار الكلاسيكي أو البديل. المكونات الحصرية لمسارات C1 و C2 و C4 الكلاسيكية والمكونات المحددة للمسار البديل هي B و D والحفز. تتضمن المكونات المحددة لمسار الكتين لابتن ملغم مانوز (MBL) والأنماط المصلية المتعلقة بالنمط MBL والأنماط المصلية من الأنزيم البروتيني المرتبط بنوع MBL الثاني. توجد عوامل أخرى مثل C3 و C5,6,7,8,9 في جميع المسارات الثلاثة. هناك بروتينات تنظيمية خاصة، إذا كانت ناقصة أو مفتقدة، فإن نشاط النظام التكميلي لم يتم بشكل صحيح. يتضمن فحص نظام النظام التكميلي تقييم الأداء الكلي للمكمّل، وتقييم المكونات المتممه وفحص البروتينات التنظيمية المعقدة.

طریقه (SRID (Single Radial Immune Diffusion

الطريقة الكمية لقياس الجلوبولينات المناعية هي مكونات النظام المتمم، مثل C3 , C4 , C1INH والبروتينات الأخرى الموجودة في الحلول البيولوجية. المبدأ العام لهذه الطريقة هو إطلاق إما مستضد أو جسم مضاد. في هذه الطريقة، يتم حل مولد الضد المحدد للمستضد في جل كامل ويتم سكب الهلام في اللوحة.

تشخيص أمراض نقص المناعة

بعد أن يأتي الهلام إلى الحالة الصلبة، توجد تجاويف داخلها (الآن أصبحت هذه الألواح جاهزة). ثم يسكب حجم معين من نموذج في الفجوات ويحضن. يتم إطلاق المستضد في الهلام، وبعد مواجهة الأجسام المضادة، يشكل حلقة رسوبية حول التجويف. قطر هذا الخاتم يزداد تدريجيا. عندما يتم إنشاء توازن بين تركيزالأجسام المضادة للمستضد، يتم تشكيل حلقة ترسيب مستقرة. في هذه الطريقة، يمكن تحديد كمية المستضد باستخدام الحلول القياسية ورسومات المنحنى المقابلة.

تشخيص أمراض نقص المناعة

طريقة إليزا (ELISA)

طريقة الیزا هي واحدة من طرق المناعية الأكثر شيوعا. إن الفحص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) هو طريقة بيوكيميائية بسيطة ذات حساسية عالية تسمح بتحليل عدد كبير من العينات في وقت واحد وكمي.

تشخيص أمراض نقص المناعة

يستند أساس طريقة الیزا على مركب مواد الضد في هذه الطريقة ، يتم استخدام خصائص الأجسام المضادة الفريدة ، بما في ذلك قوة الربط العالية الخاصة بالألفة ، والتعريف الدقيق لمولد الضد (Affinity) ، لتحديد وقياس الجزيئات الحيوية. كما أنها تستخدم لإنشاء إشارة من الإنزيمات والركائز التي تنتج الأصباغ ((Specificity)) ثم يتم قياس اللون الذي تم إنشاؤه بواسطة الجهاز. الیزا هي واحدة من أقوى الطرق المختبرية لاكتشاف اضطرابات الجهاز المناعي اليوم. يتم إجراء هذا الاختبار للكشف عن الإصابة التي يسببها أحد الأعضاء المعدية في الجسم والذي يعرض بعض الأمراض. أيضا ، يمكن الكشف عن الأجسام المضادة التي يمكن اكتشافها استجابة لبعض الأمراض أو الأمراض من خلال هذا الاختبار.
يمكن تقييم تركيز البروتينات التنظيمية المعقدة مثل مثبط C1 Inhibitor باستخدام طريقة الیزا. في هذه الطريقة ، حسب نوع الاختبا ، يتم تمييز الجسم المضاد أو المستضد بواسطة الإنزيم.
يتم إجراء الیزا بطرق متنوعة، ولكن على أي حال ، يجب أن يتم توصيل مكون مناعي أو مستضد أو جسم مضاد بمرحلة صلبة. تتمثل الخطوة الأولى من الیزا في تغطية السطح الصلب بمستضد أو جسم مضاد. النوع الأكثر شيوعًا من الطور الصلب هو الیزا ، وهو عبارة عن لوحة من 96 منزلًا ، منظمة في 8 صفوف و 12 عمودًا ، مصنوعة من كلوريد متعدد الفينيل (مرن) أو بوليسترين (غير مرن). لوحات لها اختلاف بسيط جدا. يتم تزويد الصفائح بفتحات سفلية للاختبار، والتي يتم قياسها أخيرًا عن طريق قياس لون مقياس الطيف الضوئي. يتم تزويد الألواح بآبار قاعبة مستديرة لإجراء اختبارات تقيس ألوانها في العين. هذه الألواح ليست مناسبة لقياسات الطيف الضوئي. الميزة الرئيسية للمرحلة الصلبة هي أن المستضدات أو الأجسام المضادة تتصل بسهولة بالأسطح باستخدام امتصاص الفناء.
هذه العملية تسمى عادة کوتینج. من المحتمل أن يكون ارتباط معظم البروتينات بالأسطح البلاستيكية نتيجة للتفاعلات الكارهة بين التراكيب غير القطبية والبروتينات والمصفوفة البلاستيكية. تعتمد سرعة التفاعلات الكارهة للماء على درجة الحرارة (كلما ارتفعت درجة الحرارة، كانت أسرع و احسن) ، والتركيز العالي للبروتين وحركة الطبق.
تم تصميم غسالات الیزا لتشطف في ألواح ELISA Washer ، مما يسمح لهم بالشطف في صفوف أو في لوح واحد في وقت واحد. ولكن فیه هناك أيضا إمكانية لغسل اليدوي.
تم تصميم أجهزة قياس الطيف الضوئي الخاصة لقياس الألوان في لوحات الیزا ، والتي تسمى ELISA Reader. باستخدام برنامج على هذه الأجهزة، من الممكن رسم منحنيات وتحديد كمية العينات غير المرئية بسهولة.

تشخيص أمراض نقص المناعة

اختبارقياس مجموع اختبار تدمر الدم Total hemolytic complement assay 0r CH50 assay

إن قياس القدرة الانحلارية لمركب المصل يساعد على تشخيص بعض الأمراض التي تنتج عن زيادة أو زيادة معقدات المصل.
يتم تقييم الأداء الكلي للشلال المتكامل بواسطة CH50، والذي يقيس قوة المصل لدى المريض ليخرج خلايا الدم الأجنبية. يتم تمثيل الطاقة الانحلارية للمكملة بوحدة من وحدة CH50 unitه(۵۰% Hemolytic Unit of complement) أو بوحدة من وحدة HD50 unit(Hemolytic Dose) وحدة CH50 هي كمية أو عيار المصل المطلوب لتحلل 50٪ من خلايا الدم الحمراء.

تشخيص أمراض نقص المناعة

في هذا الاختبار، يتم صب كمية معينة من كريات الدم الحمراء الحساسة في أنابيب الاختبار ثم تضيف كميات متفاوتة من مصل المريض. إن القيمة العادية لوحدة وحدة CH50 في المصل ليست ثابتة وتعتمد على المواد المستخدمة في كل مختبر لقياس الطاقة الانحلارية للمكملة وهي موحدة. أفضل استخدام من CH50 هو تحديد نقص أحد البروتينات التكميلية او المتممه. على سبيل المثال، في مريض يعاني من عدوى النيسرية المتكررة بنقص C5-9 ، يكون قياس C4 و C3 طبيعيًا ، ولكن CH50 سيكون منخفضًا جدًا.

الموارد المختارة:

ممارسات عملية في علم المناعة معتمد من قبل دکتور وارسته و الشرکاء
Abbas A, Lichtman A: cellular and molecular Immunology, fifth edition, 2003
http://www.mayomedicallaboratories.com
https://medlineplus.gov
https://www.ncbi.nlm.nih.gov

العزاء السکنی فی الاهواز، يمكنهم استخدام مختبر العمال في الأهواز بأفضل التسهيلات والتقنيات اليومیه لأي نوع من التجارب و الاختبارات.
مع کل احترام و الشکر إدارة موقع مختبر أهواز – باستور

لغو پاسخ دادن